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猴紅細胞分離液試劑盒
產(chǎn)品編號:RBCHY2012MK
別名 猴紅細胞分離液試劑盒 
英文名  
猴紅細胞分離液試劑盒
中文名稱:猴紅細胞分離液試劑盒
中文別名:猴紅細胞分離液試劑盒
產(chǎn)品類別:紅細胞的分離
 
產(chǎn)品編號:RBCHY2012MK
 
產(chǎn)品名稱:猴紅細胞分離液試劑盒
 
產(chǎn)品規(guī)格:200ml/KIT
 
產(chǎn)品價格:¥500.00元
 
本品用于分離猴紅細胞



“XXXX”動物外周血紅細胞分離液實驗方法
 
技術(shù)文檔編號:TBD0047SOP
 
【產(chǎn)品規(guī)格】
 
200ml/Kit
 
【產(chǎn)品組成】
 
為方便廣大用戶使用,試劑內(nèi)容如下:
 
  名稱 產(chǎn)品編號 規(guī)格
       
A XXXX 動物外周血紅細胞分離液   200ml
       
B 樣本稀釋液(贈品) 2010C1119 200ml
       
C 清洗液(贈品) 2010X1118 200ml
D 說明書   1 份
       
 
【實驗前準備】
 
適用儀器:最大離心力可達 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機
 
【檢驗方法】
 
全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進行。
 
首先取抗凝血按體積比 1:1 的比例加樣本稀釋液(產(chǎn)品編號:2010C1119)混勻,根據(jù)
 
稀釋后的樣本量大小,分以下兩種情況:
 
情況 A:稀釋后的血液樣本量小于 5ml 時,實驗方法如下:
 
  • 取一支 15ml 離心管,先加入與稀釋后樣本等量的分離液(注:分離液最少不得少于 3ml)。
 
  • 用吸管小心吸取稀釋后的血液樣本加于分離液液面上,600-900g,離心 25-30min(注:根據(jù)血液樣本量確定離心條件,血液樣本量越多,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達到最佳分離效果)。
 
  • 離心后,此時離心管中由上至下分為四層。第一層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細胞層。
 
  • 用吸管小心吸取第一、二、三層,棄去,在剩余紅細胞層中加入 10ml 清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118),混勻細胞。
  • 250g,離心 10min。
 
  • 棄上清。
 
  • 用吸管以 5ml 清洗液(產(chǎn)品編號:2010X1118)重懸所得細胞。
 
  • 250g,離心 10min。
 
  • 重復(fù) 6、7、8,棄上清后以 0.5ml 后續(xù)實驗所需相應(yīng)液體重懸細胞。
 
情況 B:稀釋后的血液樣本量大于等于 5ml 時,實驗方法如下:
 
  • 取一支適當(dāng)?shù)碾x心管,先加入與稀釋后樣本等量的分離液。
 
  • 將經(jīng)稀釋后的血液樣本小心加于分離液之液面上,650-950g(最大離心力可至 1000g),離心 25-30min。(注:根據(jù)血液樣本量確定離心條件,血液量越多,離心力越大,離心時間越長,具體離心條件需客戶自行摸索,以達到最佳分離效果。加入血液樣本后,樣本及分離液總體積不得超過離心管總體積的三分之二)。
 
  • 剩余步驟同“情況 A”中步驟 3 至步驟 10。
 
【注意事項】
 
  • 全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進行。為獲得最佳的實驗結(jié)果,最好在取血 2h 內(nèi)進行實驗,血液存放時間越長,細胞分離效果越差。血液放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達到分離目的。
 
  • 本實驗最好不要使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,應(yīng)使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品,因為靜電作用將導(dǎo)致細胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面,影響細胞分離效果。
  • 如第一二三層吸不干凈,會導(dǎo)致粒細胞等混雜。
 
  • 如所實驗后細胞得率或活性過低,請聯(lián)系技術(shù)支持以尋求幫助。
 
【儲存條件及有效期】
 
常溫保存,有效期 2 年。本品易感染細菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟
 
封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
 
【參考值(參考范圍)】
 
本實驗紅細胞提取率及純度均大于 80%。
 
下表為成年人外周血中各種細胞的數(shù)量及比例,用戶可適當(dāng)進行參考。
 
  紅細胞   白細胞   血小板
           
    (4.0-10.0)×109  
含量(個/L) (4.0-5.5)×1012 中性粒細胞 淋巴細胞 單核細胞 (1.0-3.0)×1011
    50%-70% 20%-40% 3%-8%  
           
 
【相關(guān)實驗技術(shù)方案】
 
  • 流式細胞技術(shù)。
 
  • 免疫組化技術(shù)。
 
 
【可能存在的問題及解決方法】
 
  • 本分離液分離細胞的原理為密度梯度離心,其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對離心條件進行適當(dāng)調(diào)整。建議對離心條件進行調(diào)整時,恒定離心時間,對離心轉(zhuǎn)速進行調(diào)整。
 
  • 本分離液依照國際標(biāo)準,全部使用藥用級原料,性能指標(biāo)與國產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同,可
 
能出現(xiàn)紅細胞沉降不完全的情況,可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
 
注:在對離心條件進行調(diào)整時,離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù),直至達到最佳分離效果,
 
離心力最小不得小于 400g,最大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min 為準。
 
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