中文名稱:兔腫瘤組織淋巴、單核巨噬、粒細(xì)胞分離液試劑盒
中文別名:兔腫瘤組織淋巴、單核巨噬、粒細(xì)胞分離液試劑盒
中文別名:兔腫瘤組織淋巴、單核巨噬、粒細(xì)胞分離液試劑盒
產(chǎn)品類別:腫瘤細(xì)胞的分離
產(chǎn)品編號(hào):LPZ2014R
產(chǎn)品名稱:兔腫瘤組織淋巴、單核巨噬、粒細(xì)胞分離液試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:3X200ml/Kit
產(chǎn)品價(jià)格:¥1200.00元
本品用于分離兔腫瘤組織淋巴、單核巨噬、粒細(xì)胞
“XXXX”動(dòng)物腫瘤組織淋巴細(xì)胞、單核巨噬、粒細(xì)胞
分離液實(shí)驗(yàn)方法
技術(shù)文檔編號(hào):TBD0052SOP
【產(chǎn)品規(guī)格】
3×200ml/Kit
【產(chǎn)品組成】
為方便廣大用戶使用,試劑內(nèi)容如下:
【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】
適用儀器:最大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)
【檢驗(yàn)方法】
全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。
紅細(xì)胞,具體操作說明詳見“紅細(xì)胞裂解液使用說明”)到 15ml 離心管中,往所得離心
產(chǎn)品編號(hào):LPZ2014R
產(chǎn)品名稱:兔腫瘤組織淋巴、單核巨噬、粒細(xì)胞分離液試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:3X200ml/Kit
產(chǎn)品價(jià)格:¥1200.00元
本品用于分離兔腫瘤組織淋巴、單核巨噬、粒細(xì)胞
“XXXX”動(dòng)物腫瘤組織淋巴細(xì)胞、單核巨噬、粒細(xì)胞
分離液實(shí)驗(yàn)方法
技術(shù)文檔編號(hào):TBD0052SOP
【產(chǎn)品規(guī)格】
3×200ml/Kit
【產(chǎn)品組成】
為方便廣大用戶使用,試劑內(nèi)容如下:
名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | |
A | 分離液 1 | 200ml | |
B | 分離液 2 | 200ml | |
C | 分離液 3 | 200ml | |
D | 試劑 F(贈(zèng)品) | F2013TBD | 200ml |
E | 樣本稀釋液(贈(zèng)品) | 2010C1119 | 200ml |
F | 清洗液(贈(zèng)品) | 2010X1118 | 200ml |
G | 說明書 | 1 份 | |
【實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備】
適用儀器:最大離心力可達(dá) 1200g 的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)
【檢驗(yàn)方法】
全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。
- 首先制備組織單細(xì)胞懸液,制備方法詳見“組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)”。取一支適當(dāng)?shù)碾x心管,依次小心加入分離液 1、分離液 2、分離液 3(體積比為 3:2:1,體積總量與組織單細(xì)胞懸液體積相等),制成梯度界面,各液面分層一定要清晰。(如組織單細(xì)胞懸液樣本量為 6ml,則加入分離液 1:3ml、分離液 2:2ml、分離液 3:1ml。)
- 用吸管小心吸取組織懸液樣本加于分離液液面上,400-500g,離心 20-30min(注:根據(jù)組織懸液樣本量確定離心條件,樣本量越多,離心力越大,離心時(shí)間越長,最大離心力可達(dá) 1200g,具體離心條件需客戶自行摸索,以達(dá)到最佳分離效果)。
- 離心后,此時(shí)離心管中將出現(xiàn)兩層環(huán)狀乳白色細(xì)胞層。
- 用吸管吸取兩層環(huán)狀目的細(xì)胞層(如有紅細(xì)胞混雜則需用紅細(xì)胞裂解液(需另購)裂解
紅細(xì)胞,具體操作說明詳見“紅細(xì)胞裂解液使用說明”)到 15ml 離心管中,往所得離心
管中加入 10ml 清洗液(產(chǎn)品編號(hào):2010X1118),混勻細(xì)胞。
【注意事項(xiàng)】
【儲(chǔ)存條件及有效期】
常溫保存,有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟
封后置常溫保存。
【參考值(參考范圍)】
本實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤組織淋巴細(xì)胞、單核巨噬、粒細(xì)胞提取率大于 80%。
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例,用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。
- 250g,離心 10min。
- 棄上清。
- 用吸管以 5ml 清洗液(產(chǎn)品編號(hào):2010X1118)重懸所得細(xì)胞。
- 250g,離心 10min。
- 重復(fù) 6、7、8,棄上清后以 0.5ml 后續(xù)實(shí)驗(yàn)所需相應(yīng)液體重懸細(xì)胞。
【注意事項(xiàng)】
- 全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,最好在取樣 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),樣品存放時(shí)間越長,細(xì)胞分離效果越差。樣品放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。
- 本實(shí)驗(yàn)最好不要使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,應(yīng)使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品,因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面會(huì)變成毛面,影響細(xì)胞分離效果。
- 如所實(shí)驗(yàn)后細(xì)胞得率或活性過低,請聯(lián)系技術(shù)支持以尋求幫助。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
常溫保存,有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟
封后置常溫保存。
【參考值(參考范圍)】
本實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤組織淋巴細(xì)胞、單核巨噬、粒細(xì)胞提取率大于 80%。
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例,用戶可適當(dāng)進(jìn)行參考。
紅細(xì)胞 | 白細(xì)胞 | 血小板 | |||
(4.0-10.0)×109 | |||||
含量(個(gè)/L) | (4.0-5.5)×1012 | 中性粒細(xì)胞 | 淋巴細(xì)胞 | 單核細(xì)胞 | (1.0-3.0)×1011 |
50%-70% | 20%-40% | 3%-8% | |||
【相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù)方案】 |
- 組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)。
- 所獲得腫瘤組織淋巴細(xì)胞、單核巨噬、粒細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)。
- 所獲得腫瘤組織淋巴細(xì)胞、單核巨噬、粒細(xì)胞的核酸提取技術(shù)。
- 所獲得腫瘤組織淋巴細(xì)胞、單核巨噬、粒細(xì)胞的鑒定方法
A.流式細(xì)胞技術(shù)
B.免疫組化技術(shù)
C.原位雜交技術(shù)
D.PCR 技術(shù)
【可能存在的問題及解決方法】
1. 由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示:
出現(xiàn)情況 | 出現(xiàn)原因 | 建議解決方案 |
離心后目的細(xì)胞存在于血漿層或稀釋液層 | 轉(zhuǎn)速過小或離心時(shí)間過短 | 適當(dāng)增減轉(zhuǎn)速 |
離心后目的細(xì)胞存在于分離液中 | 轉(zhuǎn)速過大或離心時(shí)間過長 | |
離心后白環(huán)層彌散 | 細(xì)胞密度過大 | 調(diào)整細(xì)胞密度 |
離心后白環(huán)層太淺或看不見 | 細(xì)胞密度過小 | |
- 本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心,其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)。不同地區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對離心條件進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。建議對離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí),恒定離心時(shí)間,對離心轉(zhuǎn)速進(jìn)行調(diào)整。
- 本分離液依照國際標(biāo)準(zhǔn),全部使用藥用級(jí)原料,性能指標(biāo)與國產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同,可能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不完全的情況,可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
注:在對離心條件進(jìn)行調(diào)整時(shí),離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g 為基數(shù),直至達(dá)到最佳分離效果,
離心力最小不得小于 400g,最大不得大于 1200g。離心時(shí)間以 20-30min 為準(zhǔn)。