培養基的發展史
最初進行細胞培養是使用天然培養基,即組織提取物和體液,例如:雞胚浸出液,血清,淋巴液等.隨著細胞系的不斷增加,對質量更加穩定的培養基的需求也不斷地增加,由此出現了化學成分明確的培養基,它是通過對體液成分的分析以及營養生物化學的研究而產生的.Eagle’s Basal Medium[Eagle,1955]以用后繼的Eagle’sMinimal Es-sential Medium (MEM)[Eagle.1959]成為廣泛采用的合成培養基,它們可以添加各種補充成分,如:牛血清,人血清,馬血清,蛋白水解物及胚胎提取物.隨著更多連續細胞系的出現(L929,Hela等),各種合成培養基成為培養絕大多數細胞最好的選擇.在合成培養基的發展過種有幾點成功之處:可替代血清;針對不同類型的細胞制備最適宜的培養基(例如:RPMI1640適合于類成淋巴細胞系);根據特殊的條件修正培養基(例如:Leibovitz L15不需要加入CO2和NaHCO3[Leibovitz,1963]).
分離和繁殖某種特殊類型的細胞可能需要一種選擇性的無血清培養基;而為了得到產物所進行的細胞培養(例如將細胞作為病毒繁殖的宿主,或將細胞用于非細胞特異性的分子生物學研究)則主要依賴于添加血清的Eagle’s MEM[Eagle1959]以及Dulbecco改良的DMEM[Dulbecco and Freerman,1959]或者是現在更多使用的RPMI1640[Moore et al.,1967].然而許多工業化生產技術現在使用的是無血清培養基,這樣做有利于產物的下游處理并可減少外來污染.在許多實驗室還流行一種折中的方法:即將一種成分復雜的培養基(例如Ham’s F12[Ham,1965])與一種氨基酸和維生素含量較高的培養基(例如:DMEM)混合使用.這種培養基不利于純化產物,但對于原代培養以及細胞系的繁殖卻可以產生多方面的促進作用.
DC2.4 小鼠樹突狀細胞
細胞培養基本要點
細胞增殖的控制